Sulforaphane деген эмне? | El Paso, TX Doctor Of боли
Доктор Алекс Хименес, El Пасо анын Хиропрактик
Мен сени ар кандай саламаттык сактоо, тамак-аш жана жаракат байланыштуу маселелер боюнча биздин блог билдирүүлөрүн ээ үмүттөнөм. Сен келип кам издөөгө зарылчылыгы болгондо суроолор бар болсо, бизге же өзүмдү чакырууга тартынышпайт. кызматка чакыруу же өзүмдү. Office 915-850-0900 - Cell 915-540-8444 Улуу Regards. Dr. J

Sulforaphane мисалы, брокколи, капуста, түстүү капуста жана Брюсселде өсүп катары cruciferous жашылча-жемиш, табылган phytochemical, organosulfur кошулмалардын isothiocyanate топтун ичинде бир зат болуп саналат. Ошондой эле, Бек Choy, Кале, collards, сары кычы чөптөр жана Watercress тапса болот. Изилдөөлөрү sulforaphane менен рак ар кандай түрлөрүн алдын алууга жардам берет деп көрсөткөн Nrf2 өндүрүшүн жандандыруу, Же болбосо ядролук себеп erythroid 2 байланышкан ойноорун, антиоксиданттар клетканын көз коргоочу антиоксидант механизмдерин жөнгө салуучу копиялоо ойноорун. Кийинки макалада максаты sulforaphane милдетин сүрөттөп турат.

жалпылаган

антиоксидант системасы клеткалары кычкылдануу жана xenobiotic стресске жооп турган бир негизги каражаты болуп саналат, аны KEAP1-Nrf2-БАР. Sulforaphane (Карточка), cruciferous жашылчалардан алынган бир electrophilic isothiocyanate, KEAP1-Nrf2-бар жол жана өнөкөт кычкылданууга стресс негизги etiological ролун аткара турган ооруларды дарылоодо бир молекуланын-жылдын пайыздык болуп калды жандырат. Биз Карточка менен мамиле маданияттуу, адам кабык пигмент эпителий менен митохондрия (RPe-1) клеткалар Nrf2 жана анын cytoplasmic ингибиторун KEAP1 да көз каранды эмес hyperfusion дуушар бул жерде көрсөткөн. Митохондриялык биригүү Бул апоптоздун учурунда жана ырааттуу митохондрия-жылы пайда тешиктерди тоскоол cytoprotective деп билдирди жатат, биз Nrf2-карандысыз, апоптоз-ингибитору дуушар Карточка-мамиле клеткалардын cytoprotection, staurosporine көрсөтөт. Mechanistically, Карточка митохондрия жана peroxisomes менен эрийт бөлүнүүдө себеп Drp1 ишке жалдоо жана / же кармап азайтат, бирок жалпы Drp1 мол таасир бербейт. Бул маалыматтар Карточка пайдалуу касиеттери KEAP1-Nrf2-системалуу ишке ары узартууга жана бир нече жолу клиникалык сыноолорго бул агенттин учурдагы пайдаланууга берилген андан ары суракка кепилдик экенин көрсөтүүдө.

Keywords: Sulforaphane, Nrf2, Drp1, митохондриялар, Fission, Fusion, Апоптоз

тааныштыруу

Sulforaphane Митохондриялык бөлүнүү бир Nrf2-Independent ингибиторун болуп саналат

Sulforaphane (Карточка) cruciferous жашылчалар, адатта, тамак-аш менен алынган бир isothiocyanate Кошмок [56] болуп саналат. Ал жабыркаган клеткалардан hydrolytic энзим myrosinase тилдин чыгаруу аркылуу жырткыч үчүн xenobiotic жооп катары өсүмдүктөр менен иштелип чыгат; Бул энзимдин isothiocyantes үчүн glucosinolates айлантат [42]. Акыркы эки он жылдыкта, Карточка көп, анын өлүмү тууралуу да жардам үчүн мүнөздүү болуп калды, антиоксидант жана антимикробдук касиеттери [57]. Бул натыйжалуулугун гистон deacetylase ишине жана клетка цикл прогрессия [тыюу салуу, анын ичинде кошулманын кошумча иш-чаралар аныкталган да, KEAP1-Nrf2-антиоксидант жооп элементи (БАР) жол белги байытып үчүн Карточка мүмкүнчүлүктөрүнүн таандык кылынган көп 29]. Nrf2 мастер антиоксидант копиялоо болуп саналат жана гомеостаз шартында, анын туруктуулугу cytoplasmic Cullin3KEAP1 ubiquitin тамгадан комплексинин иш-аракет аркылуу сүрүлүп жатат [20]. Тактап айтканда, Nrf2 dimeric субстрат адаптер KEAP3 үчүн милдеттүү менен Cullin1KEAP1 лигаз анык жана кийинчерээк proteasome-арачылыгы кыйроого алып копиялоо таасирин максаттуу polyUb чынжыр менен өзгөртүлдү. Бул уюмдаштыруу жүгүртүү айтуу клеткаларга ~ 2 мин Nrf15 жарым өмүр чектейт [30], [33], [46], [55]. стресске көп түрлөрүн аткаруу үчүн, айрыкча, кычкылдануу стресс, KEAP1, бир Cysteine-бай белоктун бир редокс сенсор катары, сын cysteines жана кычкылданууга өзгөртүүлөрдү киргизүү жөнүндө, атап айтканда, C151, KEAP1 жылдын CUL2 тартып Nrf1-KEAP3 киришпейт бул Nrf2 бузулушу [алдын алуу 8], [20], [55]. Белгилей кетчү жагдай, Карточка, балким, башка Nrf2 жандандыргандан, KEAP151 боюнча C1 өзгөртүү киргизүү аркылуу туурап, кычкылдануу стресс мисалы [21]. Nrf2 стабилдештирүү ал II этап антиоксидант жана детокс ген батарейканы билдиришине алдыруучу ядрого анын которуштуруу үчүн мүмкүнчүлүк берет. Nrf2 антиоксидант жооп колдоочусу элементтерине уланат (БАР) чакан MAF менен heterodimerization аркылуу тектеш максаттуу гендердин протеин [19]. Бул система митохондрия тарабынан кыйыр антиоксидантка Карточка сыяктуу эле, эркин радикалдар үчүн динамикалуу жана сезгич жооп берет [16], же ачып стресс [41] башка психологиялык булактары.

Митохондрия динамикалык, субклеткалык органеллдер жөнгө салуу жана апоптоздук Кычкылдануу-калыбына келүү үчүн ATP өндүрүү жана клетка ичиндеги кальций Топтолууда чейин уюлдук милдеттерин аскерлерин жөнгө [13] бар, [49]. Митохондриялар да клетканын ичиндеги жалкоолук кычкылтек түрлөрүнүн (ROS) негизги булагы болуп саналат. бир эле учурда ашыкча эркин радикал өндүрүштүн зыяндуу таасирлерин азайтууга, ал эми митохондриялык кызматына ATP өндүрүүнү уюлдук муктаждыктарын канааттандыруу үчүн оптималдаштыруу боюнча Ошондуктан зарыл туура жөнгө салуу. митохондриялык милдеттерин жакшы тездиги үчүн маанилүү талап митохондрия алдынча биохимиялык машиналардын катары жашап, абдан көп, жооп тармактын бир бөлүгү катары эсептелет.

Митохондриялык тармак микроорганизмдер жана милдети бөлүнүү жана синтезге ортосундагы жөнгө баланс боюнча аныкталат. Митохондриялык бөлүнүүдө кызы клетка бөлүнүү учурунда митохондрия мурасы талап кылынат [28], ошондой эле depolarized же бузулган митохондрия тандап, autophagic кыйроого алып, mitophagy [1] деп аталат. Тескерисинче, биригүү кошуна митохондрия арасында электрон ташуу чынжырынын компоненттеринин митохондриялык геномунун жана бөлүштүрүү толуктоо үчүн талап кылынат [54]. молекулярдык деёгээлде, митохондриялык Ядролук биригүү чоң, dynamin сыяктуу GTPases менен жөнгө салынат. Үч энзимдер, негизинен, Fusion жөнгө салуу: Mitofusins ​​1 жана 2 (Mfn1 / 2) чектеш митохондрия [15] ортосундагы heterotypic ара аркылуу сырткы чел кабыгы Fusion ортомчу сырткы чел кабыгы белокторду эки өтүп жатат, [25], [37], OPA1 ички болуп саналат, ал эми мембрана белок бир эле учурда ички челинин жибермейи жөнгө салуу аркылуу Булакта байланышын камсыз кылат [5]. бардык үч белоктордун GTPase иши бекем биригүү [5] үчүн талап кылынган учурда, [18] жана OPA1 ары proteases OMA1 [14] менен митохондриялык ички кабыкча ичинде комплекстүү proteolysis менен жөнгө салынат, PARL [6] жана YME1L [45 ]. Маанилүүсү, бүтүн митохондриялык кабыкча мүмкүн болуучу зыянга жана дени сак митохондрия бир бүтүндүктө бөгөт коюу үчүн натыйжалуу синтезге талап кылынат [26].

Митохондриялык бөлүнүүдө негизинен Dynamin байланышкан белок 1 деп аталган cytosolic белок (Drp1 / DNM1L) тарабынан кылдат ылгоодон жатат. Drp1 митохондриялык сырткы кабыкчасы боюнча бөлүнүү келечектүү сайттарга Органеллдер тандалчу жатат [43]. сырткы кабыкчасы боюнча Drp1 негизги кабылдагычтар митохондриялык бөлүнүүдө себеби болуп саналат (Mff) [32] жана, азыраак өлчөмдө, Fission 1 (Fis1) [51]. Андан тышкары, бир жасалма сезгич, MIEF1 / MiD51, мындан ары мүмкүн бөлүнүүдө жерлерде Drp1 белок ишин чектөөгө аракет аныкталды [58]. Бир жолу митохондриялык сырткы кабыкчасы келип токтойт, Drp1 Митохондриялар денесине тегерегинде спираль сыяктуу түзүмгө oligomerizes анан митохондриялык сырткы жана ички челинин физикалык жигинин ортомчу Аккорды гидролиз алынган энергия [17] колдонот. Мисалы, эндоплазмалык ретикулум-алынган трубочки эмес машакаттуу митохондрия толтурулган Drp1 спиралынын уруксат жоондугу кененирээк экенин ачып кооптонуу, Drp1 oligomerization чейин митохондрия баштапкы constrictor катары [12]. Актин динамикасы, ошондой эле митохондриялык бөлүнүү [24] жасаардан ER-митохондрия ара үчүн маанилүү болуп саналат. митохондриялык бөлүнүү анын ролу тышкары, Drp1 peroxisomes көбөйүшү [40] көмөктөшөт.

Drp1 экенин жакшы мүнөздөлгөн dynamin протеин абдан окшош эки протеиндердин N-терминалдык GTPase домен бар, өзүн-өзү oligomerization үчүн маанилүү Жакынкы доменди жана C-терминалдык GTPase которо турган доменди [31]. Drp1 Drp1 анын сезгич белоктор Mff менен өз ара биргелешип аркылуу митохондриялык кабыкчасы үчүн тандоого жана Fis1 ошондой эле уникалдуу B-коюу домендин аркылуу митохондрия атайын phospholipid cardiolipin анын улутка аркылуу жүзөгө [2]. Drp1 Drp1 адатта өсүшү бир homotetramer катары гана бар, ал эми жогорку митохондриялык бөлүнүүдө жерлерде тартиби жамааттын Жакынкы доменде ортомчулугу аркасында жатат [3].

митохондриялык милдети жана KEAP1-Nrf2-жаткан жолуна ортосундагы толугу менен байланышты эске алып, биз митохондриялык түзүлүшү жана иштеши боюнча Nrf2 кошулуу таасирин иликтөө. Биз Карточка, күтүлбөгөн жерден, Nrf2 жана KEAP1 да көз каранды эмес митохондриялык hyperfusion-тайымдарга ээ жерден көрсөтөбүз. Карточка Бул таасир Drp1 милдетинин бир тыюу салуу болуп саналат. Биз мындан ары Карточка Drp2 сериянын клеткалардын байкалган Nrf1-карандысыз жана опокшош болуп апоптоздун каршылык сыйлайт деп көрсөткөн. Бул маалыматтар биригип Nrf2 турукташтырууга жана жандандыруу тышкары, Карточка митохондриялык динамикасын modulates жана уюлдук кызмат орунуна жана аман сактап экенин көрсөтүп турат.

натыйжалары

Sulforaphane-тайымдарга Nrf2 / KEAP1-карандысыз M-жылдын Hyperfusionitochondria

митохондриялык тармак динамикасына Nrf2 кошулуу кесепеттерин изилдөө учурунда, биз түбөлүккө ошол дарыланууга таап, адам кабык пигмент эпителий (RPe-1) клеткалардын sulforaphane менен (Карточка), туруктуу биригүү көндүрүшкөн Nrf2 сигналдаштыруунун таасирдүү Activator жөнүндө унаа-мамиле башкаруу клеткаларга салыштырмалуу митохондриялык тармак (сүрөт. 1A жана B). Бул клеткалардын митохондрия микроорганизмдер абдан ички Drp1 боюнча siRNA тарабынан түгөнгөндө камераларда митохондрия деп окшош негизги митохондриялык бөлүнүүдө нерсени (сүрөт. 1A). Бул натыйжа митохондриялык Ядролук биригүү абалы камерада Nrf2 баскычтарында түздөн-түз жооп берген кызыктуу идеясын көтөрүп чыгышты. Бирок, мындай proteasome ингибиторун башка Nrf2 стабилизатор жана жандандыргандан клеткасы менен дем MG132, Nrf2 ингибиторун KEAP1 атыла тийген tBHQ, же далил митохондриялык биригүү азгыра эмес (сүрөт. 1A жана Б). Бул курал менен Nrf2 стабилдештирүү ички Nrf2 (сүрөт. 1C) үчүн батыш өчүрөм тастыктады. Мындан тышкары, бул түспөлүм siRNA менен ички Nrf2 боюнча далил каршы эмес (сүрөт. 2D-F) катары Nrf1 билдирүү, Карточка-жасалма митохондриялык синтезге dispensable болчу. Карточка KEAP1 [2] менен covalently Cysteine ​​калдыктардан өзгөртүү киргизүү аркылуу KEAP1-Nrf21-бар жол түрткү болгондуктан, биз Карточка-азгырган митохондриялык hyperfusion бир KEAP1 көз каранды аркылуу сигнал жокпу чечүү үчүн KEAP1 сүзүп, бирок Nrf2 карандысыз жолдору. Бирок, KEAP1 түгөнүшү да Карточка-азгырган митохондриялык Fusion (сүрөт 1G-мен.) Тезирээк ишке ашкан жок. Чынында эле, Карточка KEAP1 (сүрөт. 1G, панелдик б каршы панелдүү г) корлору менен башчыны колдогон бөлүнүүдө Учак жокко чыгарган. Бул жыйынтыктар Карточка дарылоо канонго KEAP1-Nrf2-жаткан жолуна боюнча митохондриялык биригүү көз карандысыз себеп экенин көрсөтүп турат жана Карточка түздөн-түз митохондриялык ядролук бөлүнүү, ядролук биригүү техниканы компоненттерин таасир же суракка алып келди.

Figure 1 Карточка Nrf2 / KEAP1-карандысыз митохондриялык Fusion негиз түзөт. (A) RPe-1 клеткалары DMSO көрсөтүлгөн siRNAs жана 3 күндөн кийин менен мамиле же Nrf2 Карточка (50 мкм) жандандыргандан, MG132 (10 мкм), же tBHQ (100 мкм) 4 ч менен transfected алынган. Митохондриялар (кызыл) каршы Tom20 греч белгиленген, ал эми ядро ​​(көк) DAPI менен counterstained жатат. (B) чейин митохондриялык микроорганизмдер топтой алган сандык көрсөтүү Graph (А). > Абалы күнүнө 50 клеткалар бир сокур мода баа берилген. (C) өкүлү Батыш доскада (а). (D) RPe-1 клеткалары кийин белгиленген жаткан чейин 10 ч үчүн Карточка менен мамиле жана (А), ошондой эле булганган 3 Н.М. siRNA жана 4 күн менен transfected алынган. (E) Graph (D) чейин митохондриялык түспөлүм топтой алган сандык көрсөтүү. > Абалы күнүнө 100 клеткалар бир сокур мода баа берилген. (F) өкүлү Батыш доскада чейин (D). (G) клеткалар transfected жана оригинал же siKEAP1 менен (D) катары каралат. (H) (G) клеткалары митохондриялык Учак негизинде (Б) жана (Е) катары киргизилиптир. (I) өкүлү Батыш доскада чейин (G). (Б) маалымат, (E), жана (H) ар статистикалык маанилүүлүгү 3 көз карандысыз эксперименттердин эки-куйруктуу Студенттин Т-тест менен аныкталган чейин чогултулган. Error барлар чагылдырып +/- SD (бул көрсөткүч уламыш түстүү шилтеме чечмелөө үчүн, окурман ушул берененин интернет чыгаруу деп аталат).

Sulforaphane Drp1 боюнча Митохондриялык бирикмеси төмөндөтөт

Карточка-дарылоо митохондриялык hyperfusion алдыруучу табылгага таянган, биз бул түспөлүм ашыкча сарп ишинин натыйжасы же бөлүнүүдө ишмердүүлүгүн толук к¼рс¼тм¼ же деп ой жүгүрткөн. Бул эки мүмкүнчүлүктөрү ортосунда кодулоо үчүн, биз Карточка катышуусу менен жок peroxisomes грамматикасынын салыштырган. Peroxisomes алар динамикалык органеллдер өзгөрөт-сезимдери менен дайыма болгон узундугун экенин митохондрия окшош [44]. Peroxisomes натыйжасында алардын сырткы кабыкчасындагы Fis1 да Mff менен, бар, Drp1-арачылыгы бөлүнүү [22] үчүн кабылышат, [23]. Бирок, peroxisomes биригүү митохондриялык тармагын техникасын, демек, Fusion дуушар эмес, пайдалануу эмес, [39]. Тескерисинче, пероксисома бөлүнүүдө кабыкчасы менен протеиндердин доочуда тышкары аркылуу peroxisomes колдонуудагы көпкө каршы турат [44]. peroxisomes Mfn1 / 2 жана OPA1 жок болгондуктан, биз Карточка эмес бөлүнүүдө машинаны жокко да биригүү машинаны ишке болсо, пероксисома узундугу тиешеси жок экенин айткан. унаа-мамиле клеткаларда, peroxisomes кыска, тегерек, punctiform органеллдер (сүрөт. 2, панелдер б жана г) ылайык жүргүзүлөт. Бирок, Карточка тазалоочу клеткалар салыштырганда ~ 2-эсе пероксисома узундугун көбөйдү (сүрөт. 2, панелдер е жана ж). Мындан тышкары, peroxisomes мүмкүн жигинин кемтиги көрсөтүү борборуна жакын сезе эле көп (сүрөт. 2, панелдик ч, arrowheads). Ошо сыяктуу эле, Drp1 siRNA менен transfected камераларда peroxisomes демейдегиден көп болду (сүрөт. 2, панелдер к жана л) Drp1 пероксисома бөлүнүү жана Карточка-дарылоо бөлүнүүдө машинаны чектөө менен митохондриялык жана пероксисома мумкун себеп болот деген божомолдор үчүн зарыл экенин тастыктаган.

Figure 2 Карточка пероксисома көпкө негиз түзөт. (A) RPe-1 клеткалары кийин 10 ч үчүн DMSO же 3 мкм Карточка менен мамиле көрсөтүлгөн siRNA жана 50 күн 4 Н.М. менен transfected алынган. Peroxisomes (жашыл) каршы PMP70 греч белгиленген эле, MitoTracker (кызыл), жана ДНК менен митохондрия DAPI менен counterstained. peroxisomes боюнча Либералдуу ичи Карточка менен Drp1 азайып тарабынан жасалма Учак өзгөртүүлөрдү көрүнүшү камсыз кылуу укугу (панелдер, Д, Ж, жана л) көрсөтүлгөн жок. Arrowheads кысылып ойлорду баса белгилеген. (Бул көрсөткүч уламыш түстүү шилтеме чечмелөө үчүн, окурман ушул берененин интернет чыгаруу деп аталат).

Биз кийинки Карточка Drp1 милдетин чектеп кантип аныкталат. Мүмкүнчүлүктөр сөздөр баскычтарда азайган киргизилген, жалдоо / митохондрия, oligomerization, же GTPase боюнча Enzymatic иш-сактоосу. бул кандайдыр бир терс кыскартылган митохондриялык бөлүнүү жана hyperfusion алып келет. Биз Карточка-дарылоо (инжир кийин Drp1 белок баскычтарда кайталаса өзгөрүүлөрдү аныктай алган жок. 1C жана 3A), Ошондуктан Карточка Drp1 туруктуу же сөз айкашы, Drp1 жарым-өмүргө ээ менен шайкеш> 10 өзгөртө албайт ч [50] жана Карточка дарылоо кыска мөөнөттөрү болуу деген жыйынтыкка келген. Андан ары, биз Карточка митохондрия үчүн Drp1 кызматка же сакталышын таасирин тийгизген жокпу изилденген. Келгем изилдөөлөр Карточка митохондриялык бөлчөк тартып Drp1 жоготууга көндүрүшкөн көрсөткөн (сүрөт. 3A, 7-8 жана сүрөт. 3B алышчу). Белгилей кетсек буга чейин [43], Drp1 (~ 3%) гана бир аз бөлүгү гана ар кандай убакта митохондриялык тармагы менен байланышкан учурунда туруктуу абал зат шарттары энзим көпчүлүк жашаган менен (сүрөт. 3A, 5-8 алышчу). Булар менен келгем маалыматтарды биргелешип локалдаштыруу талдоонун жардамы менен митохондрия-жергиликтүү бир ~ 40% га төмөндөп, көрсөткөн, punctate Карточка мамиледен кийин Drp1 очокторунун (сүрөт. 3C жана D) тастыкталган. Жалпысынан, бул маалыматтар митохондрия менен Drp1 боюнча аттенюатор бирикмеге Карточка менен азгырган митохондриялык биригүү, жок дегенде жарым-жартылай, экенин көрсөтүп турат. Биздин маалыматтарды ички Drp1 талдоо тирүү клетка Микроскоп менен GTPase жүгүртүүдөн мүмкүн эмес эле Карточка, Drp1, же эки митохондриялык кармап салыштырмалуу митохондриялык жумушка жолтоо экендигин айырмалай албайт.

Figure 3 Карточка митохондрия тартып Drp1 бир жоготууга себеп болот. (A) DMSO же Карточка менен 1 ч төмөнкү RPe-4 клеткалардын субклеткалык менен келгем. Жан-клетка lysates (WCL), өзөктүк (NUC), cytosolic (Cyto) жана чийки митохондриялык (Mito) үлүштөр SDS-БЕТ менен чечилет жана көрсөтүлгөн антителолор менен өчүрөм батыш үчүн иштелип чыккан. молекулярдык салмагы маркерлер, орун сол көрсөтүлөт. (B) чейин көрсөтүлгөн бөлчөк менен Drp1 боюнча densitometric сандык көрсөтүү Graphs (А). (C) RPe-1 клеткалары 10 Н.М. оригинал же siDrp1 жана 3 күндөн кийин 4 ч үчүн DMSO же Карточка менен мамиле менен transfected алынган. Drp1 (жашыл) каршы Drp1 греч, митохондрия MitoTracker менен (кызыл) DAPI менен, ядронун (көк) менен ченеп чыкты. (D) чейин Drp1 жана MitoTracker сигналдардын Automated биргелешип локалдаштыруу талдоо (C). (Б) жана (D) боюнча маалыматтар 3 жана 5 көз карандысыз эксперименттердин жыйналып, тиешелүүлүгүнө жараша, ошондой эле статистикалык маанилүүлүгү, эки-куйруктуу Студенттин Т-тест менен аныкталган. Error барлар чагылдырып +/- SD жана тилкелерди статистикалык маанисин билдирет. (Бул көрсөткүч уламыш түстүү шилтеме чечмелөө үчүн, окурман ушул берененин интернет чыгаруу деп аталат).

Sulforaphane сыйлайт коргоо Staurosportine-Кош Апоптоз Nrf2 көз карандысыз

Мурунку иш митохондриялык бөлүнүүдө Bax / Бак апоптоздун учурунда [11] тарабынан сырткы митохондриялык кабыкчасындагы тешиктерге түзүүгө уруксат экенин көрсөттү. Drp1 Бул ырааттуу тандап апоптоздун [11] учурунда митохондрия жана анык деп көрсөтүлгөн, кайра бөлүнүп митохондрия башында байкалган [27]. Тескерисинче, митохондриялык бөлүнүүдө жокко ойлонолу с бошотуу үчүн жол сырткы чел кабыгы тешиктерге түзүүгө бөгөт коюу боюнча апоптоз алаксыта эсептелет [53]. Демек, митохондриялык Fusion дем бирикмелердин, анын ичинде staurosporine тарабынан жасалма апоптоздун жылган жылдырылды (МСК) [14]. Бул Nrf1 талап болобу Карточка, ошондуктан RPe-2 клеткаларын STS-арачылыгы Каххар жана болсо, коргоп-бербесин аныкташ үчүн, биз дароо поли КП рибоз полимераз (ПАРП) жиги, ишке caspase-3 бир субстрат түрткөнүн жана бир пробирдик белгиленет Белгилүү апоптоздун маркери. 1 ч үчүн 1 мкм салык менен RPe-6 клетка гана бул Карточка кошумча дарыланууга тоскоол болгон ТАППтын абдан жөнөкөй жиги улам дарылоо (мисалы, сүрөт. 4A, 3 каршы 4 Лэйн). Бул эн тамганы турукташуусун жогорулатуу үчүн, биз мындан ары клеткаларды МСК айынан каршы apoptotic ойноорун багытталган siRNA менен алдын-ала кылуу менен апоптоз үчүн, курчутулат, Bcl-XL. Бул Pretreatment салык Bcl-XL эркбилдирүүсүнө кыскарган жана кыйла дуушар убакыт милдети деп жиги ПАРП өбөлгө (сүрөт. 4B, тар 2-4 үчүн кичи 10 салыштыруу). Маанилүүсү, 2 Карточка менен алдын-ала дарылоо ч салык дуушар камераларда ПАРП жиги жумшартууга (сүрөт. 4C, 3 каршы 4 Лэйн менен 5 каршы 6 Лэйн). Ошо сыяктуу эле, туруктуу CRISPR менен Nrf2 сериянын клеткалар / Cas9 ошо Карточка чейинки дарылоо менен STS уулуулугун корголгон (сүрөт. 4C, 11 каршы 12 Лэйн менен Лэйн 13 каршы 14 жана сүрөт. 4D) алынган. Бул коргоо да ПАРП жиги менен байкалган (сүрөт. 4C жана D) жана уюлдук Учак (сүрөт. 4E) readouts эле. CRISPR менен Nrf2 азайып натыйжалуулугу / Cas9 батыш өчүрөм (сүрөт. 4C, Nrf2 олдоксон) тарабынан тастыкталды. алдын ала айтылгандай, ошондой эле Drp1, клеткаларды бузуучу бир hyperfusion түспөлүм берет (сүрөт. 1A), ошондой эле Карточка (сүрөт. 4F жана G) менен инкубатордо башкаруу клеткаларга салыштырмалуу салык жооп ПАРП жиги бөгөттөлгөн. Жалпысынан, бул ачылыштар Карточка Nrf1 турукташтыруу жана кошулуу көз карандысыз Drp2 милдетин, чектөө, анын кубаттуулугу аркылуу апоптоздун каршы коргоону тапшыруу менен туруктуу.

Figure 4 Карточка менен cytoprotective таасирлери Nrf2 сөз (A) RPe-1 клеткалары DMSO, 50 мкм staurosporine менен дарылоого чейин 2 ч үчүн DMSO же 1 мкм Карточка менен алдын-ала мамиле (ГНС), же 50 мкм etoposide үчүн көз карандысыз болот 6 ч каршы пАРП батыш өчүрөм үчүн иштелип чыккан. (B) RPe-1 клеткалары 2.5 Н.М. оригинал, 1 Н.М. siBcl-XL, же 2.5 Н.М. siBcl-XL жана 3 күндөн кийин 1, 2, же 4 ч үчүн DMSO же 6 мкм салык менен мамиле менен transfected алынган. Өкүлү Батыш доскада көрсөтүлгөн жана молекулярдык салмагы маркерлер, орун сол көрсөтүлгөн жатат. (C) CRISPR / Cas9 түзүлгөн жапайы түрү (Nrf2WT) жана Nrf2 нокаут (Nrf2KO) RPe-1 клеткалары 1 Н.М. siBcl-XL жана 3 күндөн кийин 50 ч үчүн DMSO же 2 мкм Карточка менен алдын-ала мамиле менен transfected алынган. Андан кийин, клеткалар 1 мкм салык 2, 4, же 6 ч менен мамиле жасашчу. көрсөтүлгөн башка антителолор менен өкүлү Батыш доскада көрсөтүлгөн. (D) 3 көз карандысыз эксперименттердин жалпы ТАППтын бир пайыз катары жабышып ТАППтын сандык (жабыштым + кесилбеген). Маанилүүсү, жабышып ТАППтын өлчөмү клеткалар салык тартып Карточка коргоо копиялоо нерседен көз каранды эмес экенин көрсөтүп, Nrf2 же жок экендигин да окшош эле. (E) 20X этап-контраст сүрөттөрү (C) чейин lysates жыюу дароо чейин кабыл алынат. Масштаб тилкеси = 65 мкм. (F) Карточка дарылоо катары салык жакын-салыштырууга коргоону Drp1 деп түгөнгөнгө көрсөтүү менен сыйлайт өкүлү батыш доскада. RPe-1 клеткалары 1 Н.М. siBcl-XL жана кошумча 10 Н.М. оригинал же 10 Н.М. siDrp1 же менен transfected менен transfected алынган. 3 күн өткөндөн кийин, оригинал клеткалар (А), ошондой эле Карточка менен чейинки мамиле жана (C) жана андан кийин жыйнала чейин 4 ч үчүн МСК жана көрсөтүлгөн антителолор менен өчүрөм батыш үчүн иштелип дуушар болушкан. (G) 3 көз карандысыз эксперименттердин түзүлгөн (F) берилген маалымат үчүн (D) окшош. Error барлар чагылдырып +/- Шемдин

талкулоо

Биз Карточка KEAP1-Nrf2-жаткан жолуна анын таасиринин митохондриялык Ядролук / биригүү динамикасы көз карандысыз modulates байкашкан. Себеби митохондриялык бузулушуна жана ROS өндүрүү жана Nrf2 ишке аркылуу митохондрия-алынган эркин радикалдарды операсын зарылчылыгы ортосунда алган байланышты кызыктуу болот. Карточка Бул кошумча иш таасир мүмкүн болуучу мааниси берилген 30 клиникалык сыноолор Азыркы жүрүп тестирлөө Карточка түрдүү дарылоо үчүн ооруларынын, анын ичинде простата безинин рак оорусуна караганда болсо, өпкө оорулары, орок сымал клетка оорусу [7], [10], [ 47].

Карточка бир isothiocyanate болуп саналат [56] жана Nrf2 бузулушунун [1] бөгөт коюу үчүн түздөн-түз сын KEAP2 cysteines acylating менен Nrf21 белги ишке, анткени, ал Карточка Cysteine ​​өзгөртүүлөрдү киргизүү аркылуу ядролук бөлүнүү, ядролук биригүү эске ишин салуучу менен жактаган биригүү таасири күчтүү экенин төмөнкүчө . Биздин маалыматтар катуу Drp1 GTPase acylation түздөн-түз максаттуу эмес түшүнүп алышыбыз керек болот же жокпу, болсо да терс Карточка менен жөнгө салынуучу колдоо. Бул билим ажырымы карабастан, Drp1 милдеттери митохондрия жана peroxisomes болобуз деп ачык Карточка бузулган жатат hyperfused Карточка дарылоо жана бул органеллдер жооп Drp1 менен бөлүшүү үчүн, алардын тиешелүү жигинин окуялар [38]. Мындан тышкары, Карточка нараазычылыктар болуп жатат Drp1 суммасы азаят жана митохондрия (сүрөт. 3) боюнча суммаланат. Биздин эксперименттер бардык ички белоктор менен болду, анткени, биздин митохондриялык бөлүнүүдө жерлерде Drp1 аныктоо туруктуу абал шарттарында эмес, демек, биз Карточка менен шартталган энзим бир сактоо кемчилиги салыштырмалуу жумушка айырмалай албайт. Андан тышкары, биз түздөн-түз Drp1 барак жатат деп шектенип, Карточка ге кызматка Drp1 бөгөт митохондрия (Fis1 же Mff) бир алуучуга acylates мүмкүндүгүн жоюу мүмкүн эмес. Drp1 бар тогуз cysteines, oligomerization талап кылынат Жакынкы энчиге ичинде жашаган сегиз [3] жана GTPase которо турган энчиге (ДТК) Drp1 С-терминалын учурда жашап, алардын бири. Бул cysteines болбосун түздөн-түз acylation Drp1 бир иш кемтиги себеп жана митохондриялык динамикасына Карточка таасирин негизинен мүмкүн. Белгилей кетчү жагдай, алдын ала иш митохондрия oligomerization жана каталитикалык ишинде кемчиликтер боюнча Drp1 сактоону жойсок болот [52] деп эсептейт. Cys644 ДТК мүлктүн бул Cysteine ​​phenocopies мутант бул генетикалык көрсөтүү мурунку иши боюнча өзгөчө жагымдуу максаттуу болуп начарлата Drp1 GTPase ишин [4] жана бул өзгөчө Cysteine ​​thiol-жалкоолук electrophiles менен өзгөртүлдү [9]. Бул көрүнүктүү суроонун токтом жалпыга маалымдоо Spectrometric текшерүүнү талап кылат.Ал на, биз клиникалык тиешелүү кошулмаларды Карточка үчүн романын, cytoprotective милдетин аныктадык. Кожоюну каршы тийген копиялоо ойноорун Nrf2 иштетип тышкары, Карточка митохондриялык жана пероксисома Fusion өбөлгө түзөт жана бул таасир Nrf2 көз каранды эмес. Бул кубулушту негизги механизм GTPase Drp1, митохондриялык жана пероксисома бөлүнүү негизги медиатордун милдетин кыскартуу билдирет. Карточка-кыйыр митохондриялык биригүү негизги натыйжасы клеткалары апоптоз ингибитору staurosporine токсикалык таасири туруштуу болуп саналат. Бул кошумча Карточка менен cytoprotective аракеттер жашы башкы коркунуч болуп саналат, ал үчүн көптөгөн neurodegenerative ооруларга өзгөчө клиникалык Коммуналдык болушу мүмкүн (мисалы, Паркинсон оорусу, тосушту оорулары, Жашы байланышкан апноэден) бул илдетке чалдыккандар катары апоптоздун менен байланышкан жана кыскармак Nrf2 өлчөмү жана / же dysregulation [35], [36], [48]. Жалпысынан, бул маалыматтар cytoprotective Карточка менен KEAP1-Nrf2-системалуу ишке ары узартууга жана андан ары изилдөө кепилдик касиеттери бир нече клиникалык сыноолорго бул агенттин учурдагы пайдаланууга берилген деп көрсөтөт.

Материалдар жана ММетоддору

Апоптоз сынамыгын

Клеткалар карата абал боюнча төмөндө көрсөтүлгөн siRNA менен себилген жана transfected алынган. клеткалар митохондриялык Fusion түрткөнүн 50 ч үчүн 2 мкм sulforaphane менен алдын-ала мамиле жана Каххар түрткөнүн 1 мкм staurosporine менен мамиле жок. оруу-жыюу убагында, жалпыга маалымдоо каражаттарынын айрым тубе чогултулган жана apoptotic клеткаларды Пеле үчүн жогорку ылдамдыктагы экстрагирлөө дуушар болгон. Бул клетка Тоголокчо жактоочусу клеткалары менен бирге жана 2 жолу топтолгон Laemmli Санитардык-жылы solubilized болгон. Үлгүлөр каршы ПАРП батыш өчүрөм дуушар болушкан.

CRISPR / Cas9 иштеп муун

LentiCRISPR / eCas9 1.1 түзүү үчүн, LentiCRISPR v2 (addgene #52961) Age1 жана BamH1 менен биринчи жолу кесип болгон. Кийинки, SpCas9 eSpCas9 1.1 (addgene #71814) тартып ПКО төмөнкүдөй грунттарды колдонуп Age1 жана BamH1 чылуу менен күчөтүлгөн (Forward AGCGCACCGGTTCTAGAGCGCTGCCACCATGGACTATAAGGACCACGAC, Кайтарым AAGCGCGGATCCCTTTTTCTTTTTTGCCTGGCCGG) жана жогоруда кесүү багытына алып байлашат болду. sgRNA тизилиши Benchling.com колдонуу менен аныкталган. Параметрлер жогорку боюнча максаттуу жана төмөнкү тышкаркы максаттуу баллы менен коддоо ырааттуулукту максат коюлган. төмөнкү тизилиши (бутага катар баса, HS sgNFE2L2 # 1 мааниде CACCGCGACGGAAAGAGTATGAGC, antisense AAACGCTCATACTCTTTCCGTCGC; HS sgNFE2L2 # 2 мааниде CACCGGTTTCTGACTGGATGTGCT, antisense AAACAGCACATCCAGTCAGAAACC; HS sgNFE2L2 # 3 мааниде CACCGGAGTAGTTGGCAGATCCAC, antisense AAACGTGGATCTGCCAACTACTCC) Сатурн жана BsmB1 LentiCRISPR / eCas9 1.1 кесип салып байлашат алынган. Lentivirally жуккан RPe-1 клеткалары puromycin менен тандалып алынган жана топтолгон калк катары сакталып калды. Плей-immunofluorescence жана батыш өчүрөм тастыктады.

Клетканын Маданият жана Transfections

Адам кабык боёк эпителий клеткалары теломераза менен өзгөрүлгүлө (RPe-1) (ATCC) Dulbecco өзгөртүлдү Адлер Медиум (DMEM) 1 г / L глюкозаны пенициллин менен толукталсын камтыган, бул арзанга т, 1X эмес маанилүү аминокислота Ананас (Life Technologies) менен маданияттуу болгон, жана 10% Fetal Bovine Serum (Life Technologies). siRNA-transfections үчүн 30,000-35,000 клетка / мл түнөп себилгенин. Клеткалар 10 Н.М. siRNA кан-эркин DMEM жана 0.3% менен бирге нашатыр Interferin transfection реагенти (PolyPlus) кабыл алды. апоптоз маа- үчүн клеткалар 1 Н.М. Bcl-XL siRNA кабыл алды. Клеткалар 2-3 күн кийинки transfection чогултулчу.

Химиялык, антителолор жана siRNA Oligos

α-тубулин (клеткалык сигналдаштыруунун), β-тубулин (Сигма), Drp1 (BD биоилимдерде), KEAP1 (Proteintech), Ламин B1 (Abcam), ПАРП (клеткалык сигналдаштыруунун), PMP70 (Abcam), жана Tom20 (BD биоилимдерде каршы антителолор батыш өчүрөм жана immunofluorescence үчүн 1 dilutions:) 1000 боюнча пайдаланылган. Үй-каршы Nrf2 коен антитело 1 колдонулду: 2000 үчүн батыш өчүрөм [34], [59]. Sulforaphane (Sigma) жана staurosporine (Tocris) тиешелүү 50 мкм жана 1 мкм боюнча пайдаланылган. эгер башкасы көрсөтүлбөсө, Drp1 (Dharmacon), Nrf2 (Dharmacon), KEAP1 (клеткалык сигналдаштыруунун) жана Bcl-XL (клеткалык сигналдаштыруунун) каршы siRNAs 10 Н.М. боюнча пайдаланылган.

Immunofluorescence жана Vivo маркаларында

18 мм айнек coverslips боюнча уруктуу клеткалар 3.7% КЖЧнын негизги транспорт же дары-дармек менен мамиле жана 0.2% Triton X-100 / PBS боюнча муздун 10 мүн үчүн permeabilized алынган. Негизги антителолор 3% оору жана кан Методикалык сунуштар менен инкубатор болгон (BSA) түнү 4 ° С PBS-жылы. PBS Апартаменты кийин, клеткалар 1 ч түр-ылайыктуу үчүн инкубатор, ал Alexa488- же Alexa546-, жактагы орто антителолор (аралаштырып 1: 1000) жана 0.1 мкг / мл DAPI (Сигма) 3% BSA / PBS-жылы. Митохондриялар 20 каршы Tom200 immunofluorescence же клеткаларды incubating тарабынан же саналышчу.Бул Н.М. MitoTracker Red CMXRos (молекулярдык иш козгобойт, Inc.) жаздырууга чейин 30 ° С 37 мүн кан-эркин DMEM менен.

Микроскоп, Image талдоо

Immunofluorescence үлгүлөрдү LSM710 Confocal микроскоп (Carl Zeiss) жөнүндө эсептелчү. Micrographs Adobe Photoshop CS63 менен өзгөртүп, күчөтүлгөн 100X же 6X мунай сууга максаттарын жана сүрөттөрдү колдонуп басып алды. Co-локалдаштыруу үлгүлөрдүн анализдеринин инсандыгы сокур, ал эми кол койгон чектерден менен Carl Zeiss LSM710 биргелешип локалдаштыруу мүмкүнчүлүктү пайдалануу менен жүзөгө ашырылган. Масштаб барлар боюнча, көрсөтүлгөн, эгер башкача, 10 мкм болуп саналат. Митохондриялык микроорганизмдер сокур гол менен бааланган. Эгер бир клетканын митохондрия бир нече эле колдоого алынган, тегерек, puncta кодулоо, клетканын бөлүнүү "деп сайылган. жеке митохондрия десек, бүт митохондриялык тармак үзгүлтүксүз пайда болсо, клетка "биригүү" деп сайылган. кластердик митохондрия менен бардыгы, анын ичинде башка клеткалар, "орто" катары киргизилиптир.

субклеткалык Fractionations

RPe-1 клеткалары айкашуусу чейин жетип калган. бир PBS жууп кийин, клеткалар 600 боюнча экстрагирлөө кабылган 10 мүн г × жана 600 μL обочолонуу Санитардык-жылы resuspended (210 MM Маннит, 70 MM Сахароза, 5 мм Колгатина, 1 мм EDTA рН 7.4 + 1 MM ЕБРР). токтото туруу бир Dounce homogenizer менен 30 жолу lysed болду. homogenate бир бөлүгү катары сакталып калган, "бүт клетка lysate." Калган 800 мүн ядролор Пеле үчүн г × 10 боюнча экстрагирлөө дуушар болгон. Supernatants 1500 мүн калган ядролор жана unlysed клеткаларды тазалап үчүн г × 10 боюнча экстрагирлөө дуушар болушкан. Бул supernatant 15,000 мүн митохондрияны Пеле үчүн г × 15 боюнча экстрагирлөө дуушар болгон. supernatant "cytosolic бөлчөк" катары сакталып калган. Тоголокчо PBS жумшак жууп, обочолонуп, Санитардык-жылы resuspended болгон. Ар бир үлүшүнөн белок топтолуу bicinchoninic кислотасы (BCA) тамганы жана белокко барабар сумма SDS-БЕТ менен чечилип менен өлчөнгөн.

Батыш өчүрөм

Клеткалар PBS жууп, 2 убакта solubilized алынган Laemmli solubilizing туруучу (100 мм Антипатриске [рН 6.8], 2% SDS, 0.008% bromophenol ачык көк, ачык 2% 2-mercaptoethanol, 26.3% glycerol жана 0.001% топтолгон Pyrinin Y). Lysates 5 мин натрий dodecyl кычкыл (SDS) polyacrylamide ЗАРИ жүктө чейин кайнатпай алынган. Белоктор nitrocellulose кабыкчаларындагы өткөрүлүп берилген жана кабыкча 1% Сүт / TBST менен 5 ч үчүн бөгөттөлгөн. Негизги антителолор 5% Сүт / TBST менен жуулуп чийип 4 ° С түнү менен инкубатордо болгон. Кашыкка peroxidase (арактан) орто антителолор 5% Сүт / TBST менен аралаштырып эле -conjugated. Доскада өркүндөтүлгөн chemiluminescence менен иштелип жана densitometric quantifications ImageJ программалык каражаттарды пайдалануу менен ишке ашырылган.

Dr Хименес Ак Coat

Sulforaphane башкалардын арасында cruciferous жашылча, анын ичинде брокколи, капуста, түстүү капуста, Кале жана collards, алынган organosulfur заттардын isothiocyanate жыйноодон турган химиялык зат болуп эсептелинет. Sulforaphane энзим myrosinase glucoraphanin, бир glucosinolate, sulforaphane салып, ошондой эле sulforaphane-glucosinolate катары белгилүү кайра качан өндүрүлгөн. Брокколи өнүп капуста glucoraphanin жогорку топтоо же sulforaphane үчүн прекурсорлордун бар. Илимий изилдөөлөр sulforaphane адам денесиндеги антиоксидант мүмкүнчүлүктөрүн ар кандай саламаттык сактоо маселесин алдын алуу үчүн жандандырганын көрсөттү.

Dr. Алекс Хименес DC, демекчи Insight

Sulforaphane жана анын натыйжалары боюнча Рак, талпынган, карылыктан, Мээ жана жүрүм-Жүрөк оорулары & More

Isothiocyanates сиз диета ала ала турган абдан маанилүү бир өсүмдүк кошулма бар. бул Video Мен эч качан жасалган алар үчүн абдан комплекстүү ишти жасоо. Кыска чар жайыт? Сүйүктүү темага Skip төмөнкү убакыт пунктка бир чыкылдатуу менен. толук сабында.

Негизги бөлүмдөрү:

  • 00: 01: 14 - Рак жана өлүм
  • 00: 19: 04 - Картаюу
  • 00: 26: 30 - Мээ жана жүрүм-туруму
  • 00: 38: 06 - Final эске салабыз
  • 00: 40: 27 - Dose

Толук убакыт:

  • 00: 00: 34 - sulforaphane киргизүү, роликтин негизги багыттарынын бири.
  • 00: 01: 14 - Cruciferous өсүмдүк керектөө жана ар себеп өлүмүнүн азайышы.
  • 00: 02: 12 - простата безинин рак оорусуна тобокелдиги.
  • 00: 02: 23 - Табарсыктын рагын тобокелдиги.
  • 00: 02: 34 - тамеки тобокелдиктин Lung рак.
  • 00: 02: 48 - Эмчек бездери тобокелдиги.
  • 00: 03: 13 - Гипотеза: Сиз буга чейин рак болуп жатсачы? (Interventional)
  • 00: 03: 35 - Чакырган механизми айдоо рак жана өлүм Associative маалыматтар.
  • 00: 04: 38 - Sulforaphane жана рак.
  • 00: 05: 32 - Animal далилдерди көрсөтүү күчтүү келемиштер менен табарсык шишик өнүктүрүү боюнча брокколи чырпык көчүрмө таасири.
  • 00: 06: 06 - простата безинин рак менен ооруган sulforaphane түздөн-түз кошулмаларын таасири.
  • 00: 07: 09 - иш жүзүндө эмчек кыртышында isothiocyanate метаболиттерди Bioaccumulation.
  • 00: 08: 32 - көкүрөк рагы кылуучу клеткалар Inhibition.
  • 00: 08: 53 - History сабак: Brassica түркүмүндөгү байыркы Римдеги саламаттык касиетке ээ деп белгиленген.
  • 00: 09: 16 - carcinogen чыгаруу (бензол, acrolein) күчөтүү Sulforaphane жөндөмдүүлүгү.
  • 00: 09: 51 - NRF2 антиоксидант жооп элементтер аркылуу генетикалык өтүү болуп саналат.
  • 00: 10: 10 - NRF2 жандантуу glutathione-S-туундулары аркылуу carcinogen чыгаруу арттырат кандай.
  • 00: 10: 34 - Кандагар өнүп glutathione-S-transferase жогорулатуу жана ДНК зыянды азайтуу.
  • 00: 11: 20 - Broccoli чырпык суюк 61% га бензин чыгаруу жогорулатат.
  • 00: 13: 31 - жогорку аба менен Broccoli чырпык homogenate көбөйөт антиоксидант энзимдер.
  • 00: 15: 45 - Cruciferous өсүмдүк керектөө жана жүрөк оорулары өлүмгө.
  • 00: 16: 55 - Broccoli чырпык порошок диабет 2 түрүнө кан липиддердин жана жалпы жүрөк оору коркунучун жогорулатат.
  • 00: 19: 04 - башталышы карылык бөлүм.
  • 00: 19: 21 - Sulforaphane-байытылган диета көбөйтөт өмүрү 15 чейин кайда% 30 үчүн (белгилүү бир шарттарда).
  • 00: 20: 34 - узак үчүн аз шишип мааниси.
  • 00: 22: 05 - Cruciferous жашылча жана брокколи чырпык порошок адамдардын сезгенүү маркерлер, ар түрдүү кыскартуу көрүнөт.
  • 00: 23: 40 - Орто-Video эске салабыз: рак, улгайып калган бөлүктөрү
  • 00: 24: 14 - Mouse изилдөөлөр sulforaphane карыганда ийкемдүү иммундук кызматын жакшыртуу үчүн сунуш.
  • 00: 25: 18 - Sulforaphane Болдинг бир чычкан моделине жакшыртылган чач өсүшү. сүрөт 00 боюнча: 26: 10.
  • 00: 26: 30 - мээ жана жүрүм-бөлүмүнүн башталышы.
  • 00: 27: 18 - аутизм жөнүндө брокколи чырпык көчүрмө таасири.
  • 00: 27: 48 - шаблон боюнча glucoraphanin таасири.
  • 00: 28: 17 - депрессия талкуу (Чакырган механизми жана изилдөөлөр) Башы.
  • 00: 31: 21 - Mouse fluoxetine катары сыяктуу эле натыйжалуу стресс-жасалма депрессия шоу sulforaphane ар түрдүү моделдерин 10 колдонуп изилдөө (Prozac).
  • 00: 32: 00 - Изилдөө чычкандардын glucoraphanin түздөн-түз Кирүүчү коомдук кыйратылышын стресс моделинен депрессия алдын алуу сыяктуу эле натыйжалуу болуп турат.
  • 00: 33: 01 - neurodegeneration бөлүмүнүн башталышы.
  • 00: 33: 30 - Sulforaphane жана тосушту оору.
  • 00: 33: 44 - Sulforaphane жана Паркинсон оорусу.
  • 00: 33: 51 - Sulforaphane жана Hungtington оорусу.
  • 00: 34: 13 - Sulforaphane жылуулук шок белокторду жогорулатат.
  • 00: 34: 43 - мээсинен жаракат бөлүмүнүн башталышы.
  • 00: 35: 01 - Sulforaphane TBI эс (чычкан изилдөө) жакшыртат кийин дароо сайып.
  • 00: 35: 55 - Sulforaphane жана нейрондордун пластикалык.
  • 00: 36: 32 - Sulforaphane үйрөнүп өркүндөтүп, модель чычкандардын түрү II диабет менен.
  • 00: 37: 19 - Sulforaphane жана менен ооруган мускулатура.
  • 00: 37: 44 - булчуң спутник клеткаларында Myostatin аталат (ЭКУ).
  • 00: 38: 06 - кеч-Video эске салабыз: өлүмү жана рак оорусу, ДНК зыян, кычкылдануу стресс жана сезгенүүсү, бензол чыгаруу, жүрөк-кан тамыр оорулары, кант диабети түрү II, мээдеги таасирлери (депрессия, аутизм, шаблон, neurodegeneration), NRF2 жолуна.
  • 00: 40: 27 - брокколи өсүп же sulforaphane бир дозасын коому жөнүндө ой жүгүртүү.
  • 00: 41: 01 - Анекдоттор үйдө өсүп боюнча.
  • 00: 43: 14 - тамак температуранын жана sulforaphane иши жөнүндө.
  • 00: 43: 45 - glucoraphanin тартып sulforaphane боюнча Gut бактериялар өзгөртүү.
  • 00: 44: 24 - жашылча жигердүү myrosinase менен бирге болгондо толуктоолор жакшы иштейт.
  • 00: 44: 56 - Cooking ыкмалары жана cruciferous жашылчалар.
  • 00: 46: 06 - Isothiocyanates goitrogens эле.

Acknowledgments

Sciencedirect.com/science/article/pii/S2213231716302750

Кантип Sulforaphane пайда болгон?

Жылытуу Epithiospecifier протеин ишин жана брокколи менен Sulforaphane түзүү жогорулатат төмөндөшү мүмкүн

жалпылаган

Sulforaphane, брокколи бир isothiocyanate, абдан күчтүү тамак-аш алынган anticarcinogens бири болуп саналат. Бул татаал бойдон жашылча азыркы эмес, тескерисинче, анын glucosinolate белгиси, glucoraphanin, аракетине myrosinase тартып пайда болот, бир thioglucosidase энзим, брокколи кыртыш жанчылып, же чайнап жатат. Бирок, glucoraphanin тартып sulforaphane кирешелүүлүк бир катар иликтөөлөр көрсөткөндөй болуп саналат төмөн, жана азык-bioactive nitrile аналогдук, sulforaphane nitrile деп, өсүмдүк кыртыш бөлмө температурасында жабыркаган алгачкы гидролизи продукт болуп саналат. Жашыруун далилдер, Arabidopsis жылы glucosinolates тартып nitrile пайда жылуулук сезгич протеин тарабынан көзөмөлдөнөт деп божомолдоого болот epithiospecifier белок (ESP), myrosinase бир эмес каталитикалык cofactor. Биздин максаттарыбыз кошулуу менен ченегенде, брокколи ESP ишин, анда ESP иш, sulforaphane мазмуну жана BIOACTIVITY жылуулук-каранды өзгөрүүлөрдү ортосундагы байланыш бар болсо, аныктоо, sulforaphane жана sulforaphane nitrile түзүү боюнча жылытуу брокколи жалбырактардын кесепеттерин алып, өнүп карап турган клетка маданият этабы II детокс энзим quinone редуктаздык (QR). жаңы брокколи данекке же брокколи өнүп жылытуу учурда sulforaphane пайда жогорулаган атомдорун алмашуу үчүн ° C чейин 60 жана sulforaphane nitrile пайда кыскарган. ESP ишинин олуттуу жоготуу sulforaphane nitrile пайда тёмёндёшънё окшош. Жылытуу ° C жана жогоруда брокколи жалбырактардын да буюмдардын пайда кыскарган 70 үчүн, брокколи өсүп бирок ал азырынча жок. маданияттуу чычкан hepatoma Hepa lclc7 камераларда QR боюнча дарстарында sulforaphane калыптанышында көбөйөт окшош.

Алдын-ала жылытуу брокколи данекке жана өнүп ° C кыйла 60 кыйратып кийин өсүмдүк кыртыш үзүндүлөрү боюнча sulforaphane боюнча myrosinase-кылдат ылгоодон түзүү (SF) көбөйгөн. Бул sulforaphane nitrile (SF Nitrile) түзүү жана epithiospecifier белок (ESP) иш төмөндөшү менен байланыштуу болгон.

Keywords: Брокколи, Brassica oleracea, Cruciferae, Рак, Anticarcinogen, Sulforaphane, Sulforaphane nitrile, Epithiospecifier белок, Quinone редуктаздык

Жыйынтыктап айтканда, sulforaphane табылган phytochemical болуп саналат брокколи,жана башка cruciferous жашылчалар. ички жана тышкы себептер менен шартталган .Зайтун боюнча көзөмөлсүз суммасы акыр-соолук маселелери боюнча ар түрдүү алып келиши мүмкүн: адам денесиндеги оксидаттык стресстин алып келиши мүмкүн. Sulforaphane антиоксиданттар клетканын көз коргоочу антиоксидант механизмдерин жөнгө берет Nrf2 бир копиялоо эске өндүрүшүн жандандыруу мүмкүн. Биздин маалыматтардын көлөмү мануалдык жана жүлүн саламаттык сактоо маселелери менен гана чектелип келет. маселени талкуулоо үчүн, доктор-Хименес сурагандан да же биз менен байланышууга болот 915-850-0900 .

Dr. Alex Хименес менен тандалган

из шилтеме: Sciencedirect.com

Green Call Азыр Button H .png

Кошумча тема: курч Back Pain

Бел оорусу дүйнө жүзү боюнча иш эмгекке көп таралган себептери жана өтүп кеткен күндөрдүн бири болуп саналат. Артка оору дарыгер кызматтык иш сапарлары боюнча экинчи жалпы себептен касиет, жогорку дем алуу органдарынын жугуштуу гана көп болду. Болжол менен калктын 80 пайызы өмүр бою жок дегенде бир жолу бели болот. омурткасы башка жумшак ткандардын арасында сөөктөрү, муундары, байланыштары жана кыймылдоону турган комплекстүү түзүлүш болуп саналат. Анткени, мисалы, бул, жаракат алган жана / же оорлотулган шарттардын herniated дисктерде, Акыры оору белгилери алып келиши мүмкүн. Спорт жаракат же жол кырсыгына жараат көп учурда белдин оорушун абдан көп себеп бар, бирок, кээде кыймылдардын жөнөкөй оор натыйжаларга алып келиши мүмкүн. Бактыга жараша, мисалы, хиропрактика сактоо сыяктуу башка дарылоо сынап, акыры оору жардам жакшыртуу омуртка өзгөртүүлөрдү жана кол менен иштөөдө, колдонуу аркылуу бели басууга жардам берет.

карикатура кагаз бала блог сүрөт

EXTRA EXTRA | МААНИЛҮҮ ТЕМА: сунушталууда El Paso, TX Хиропрактик

***